前言
乳腺癌(breast carcinoma)居我國女性惡性腫瘤發(fā)病率首位，是嚴(yán)重威脅女性健康的惡性腫瘤。隨著乳腺癌相關(guān)研究的不斷進(jìn)展，作為臨床前體內(nèi)研究的基礎(chǔ)，乳腺癌動物模型的建立也在不斷進(jìn)步。乳腺癌實(shí)驗(yàn)動物模型可分為自發(fā)性、誘發(fā)性、移植性、轉(zhuǎn)基因或基因敲除型及乳腺癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移型等5大類，這些動物模型為臨床試驗(yàn)設(shè)計(jì)提供大量的客觀可靠的數(shù)據(jù)。
移植腫瘤動物模型是指將乳腺癌組織或細(xì)胞移植于實(shí)驗(yàn)動物培養(yǎng)出的模型，目前應(yīng)用較為廣泛。根據(jù)移植物來源分為同種移植和異種移植（多為人源性乳腺癌）。同種移植利用已建立的自發(fā)性或誘發(fā)性乳腺癌細(xì)胞株，在同種或同品系動物中進(jìn)行移植，多為鼠源性乳腺癌，目前世界范圍內(nèi)建立了很多的可移植性動物乳腺癌細(xì)胞株，移植所用的乳腺癌細(xì)胞株有嚴(yán)格的種系特異性。常用的有：來源于BALB/c小鼠的4T1和TM40乳腺癌細(xì)胞株，C57BL/6小鼠的E0771乳腺癌細(xì)胞株，TA2系小鼠自發(fā)B型乳腺癌細(xì)胞株MA-737,615系小鼠自發(fā)B型乳腺癌中建立的細(xì)胞株（如MC-615、B6和B9、Ca615)等。同種移植法建立乳腺癌動物模型的方法相對簡單，將體外培養(yǎng)的細(xì)胞或者腫瘤組織塊， 接種同系小鼠背部或者乳腺脂肪墊下即可。
異種移植模型是利用已建立的人類乳腺癌細(xì)胞株或人類乳腺癌組織塊移植于免疫缺陷動物體內(nèi)所建立的動物模型。難度相對較大，尤其是將人類乳腺癌組織塊直接接種免疫缺陷小鼠建立動物模型成功率不高。用人乳腺癌細(xì)胞株建立異種移植乳腺癌動物模型，常用的人乳腺癌細(xì)胞株有：MCF-7、MDA-MB-231和MDA-MB-468等。
部分造模方法
使用動物：裸鼠、小鼠
【造模機(jī)制】：
異種移植模型是指利用已建立的人類乳腺癌細(xì)胞株移植于免疫缺陷動物體內(nèi)所建立的動物模型。裸鼠和嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷(severe combined immune deficiency,SCID)小鼠，都是單基因隱性突變形成的，裸鼠T細(xì)胞免疫功能缺陷；SCID小鼠T、B細(xì)胞免疫功能嚴(yán)重缺陷，因此人類的腫瘤和免疫活性細(xì)胞容易生長不被排斥，裸鼠和SCID小鼠皮下是移植人類腫瘤的理想位置，是體內(nèi)篩選抗腫瘤藥物主要選擇的部位。
【造模方法】：
目前較常用的細(xì)胞株是雌激素受體陽性的MCF-7人乳腺癌細(xì)胞株。復(fù)蘇MCF-7細(xì)胞后，用DMEM完全培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)后制備}1×107/ml的單細(xì)胞懸液，每只0.2ml，注射于6~8周齡的裸鼠背部，出針后用醫(yī)用棉簽按壓1~2分鐘，防止細(xì)胞懸液從針孔處漏出。待腫瘤體積增長至1cm×1cm×1cm體積時(shí)取腫瘤組織，置于不含牛血清的培養(yǎng)基中，剝離干凈，剪成大小約1mm×1mm×1mm的小塊，用20ml注射器的針頭和1ml的注射器于裸鼠背部，每只注射1個(gè)瘤塊，出針后用醫(yī)用棉簽按壓，直至無液體從針孔漏出。
觀察裸鼠的飲食活動及精神狀態(tài)等一般情況，待瘤體積增長至0.5cm×0.5cm×0.5cm即可隨機(jī)分組進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。該移植瘤模型也可選用SCID小鼠進(jìn)行，成功率更高，方法同上。
【模型特點(diǎn)】：
動物接種瘤塊2周后進(jìn)入瘤組織快速增長期，隨著時(shí)間的延長，腫瘤組織外圍布滿豐富的血管，瘤體逐漸增大。無外因干擾，該移植瘤模型維持2個(gè)月左右，隨著瘤體積的增大，機(jī)體出現(xiàn)惡病質(zhì)狀，直至死亡。
【模型的評估和應(yīng)用】：
該模型腫瘤生長能模擬人惡性腫瘤成瘤后過程，成瘤率高，時(shí)間均一，瘤體大小和重量容易測量，便于進(jìn)行基礎(chǔ)和臨床前研究。由于宿主原因（特別是NK細(xì)胞的活性）裸鼠皮下移植的人類腫瘤很少發(fā)生轉(zhuǎn)移和侵襲鄰近組織，保持人類腫瘤的組織形態(tài)和免疫學(xué)特點(diǎn)以及特有的染色體組型和對抗腫瘤藥的原有敏感，且培養(yǎng)條件等要求比SCID小鼠低，易于動態(tài)觀察腫瘤的生長狀態(tài)，因此，裸鼠是目前進(jìn)行人乳腺癌細(xì)胞異位移植最為常用的實(shí)驗(yàn)動物。
【模型評估和應(yīng)用】：
移植乳腺癌動物模型優(yōu)點(diǎn)多：首先這些乳腺癌細(xì)胞株的生物學(xué)特性比較明確，其次建立模型周期短，均一性好，腫瘤成長速度較一致，個(gè)體差異小，并且可以在實(shí)驗(yàn)動物中連續(xù)移植，長期保留，易于觀察對照，便于科研成果相互比較和交流，是目前抗癌藥物篩選和藥效學(xué)研究常用的方法。尤其很多實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過篩選鑒定后獲得乳腺癌骨轉(zhuǎn)移、腦轉(zhuǎn)移細(xì)胞株更具有特色。但是，用人類腫瘤細(xì)胞在免疫缺陷小鼠上建立模型需要選用周齡小一點(diǎn)的裸鼠（裸鼠只是細(xì)胞免疫功能缺陷，但隨著生長發(fā)育，其細(xì)胞免疫功能會恢復(fù)一點(diǎn)，所以周齡大的裸鼠腫瘤接種成功機(jī)會減少），尤其是用組織塊接種免疫缺陷小鼠，多數(shù)用martix gel包被，有時(shí)對雌激素受體陽性腫瘤需輔助增加雌激素以保障模型建立成功，且SCID小鼠的遺傳背景是否純正也很關(guān)鍵。
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