前言
淋巴瘤(lymphoma)是發(fā)生于淋巴結(jié)及（或）淋巴結(jié)外淋巴組織的惡性腫瘤，是一類包含多種不同臨床表現(xiàn)和分子生物學特征的腫瘤。近年來，隨著艾滋病及繼發(fā)性免疫抑制疾病的增多，其發(fā)病率在世界各國明顯上升，但其基礎(chǔ)和臨床研究深度和廣度仍很有限。近年來，人們相繼建立各種淋巴瘤動物模型，從自發(fā)性、誘發(fā)性腫瘤模型到廣泛運用的移植性腫瘤模型以及運用分子生物學技術(shù)建立的轉(zhuǎn)基因動物模型等，這些模型為深入研究淋巴瘤病因、發(fā)病機制、診斷和治療等提供了有效的研究手段。
部分造模方法
使用動物：小鼠
【造模機制】：
用已建立的淋巴瘤細胞株或患者淋巴瘤組織種植于免疫缺陷動物體內(nèi)可建立移植性淋巴瘤模型，顯現(xiàn)該腫瘤的特性，是目前研究最多的腫瘤模型。目前，移植性淋巴瘤模型國內(nèi)外主要采用以下兩種移植方法：細胞種植法和組織塊移植法。
【造模方法】：
1.細胞種植法 人淋巴細胞(Raji)，1×106個/只，腹腔注射在5~6周雌性BALB/c-nu/nu小鼠，一般22天左右出現(xiàn)明顯的腹水。如果接種細胞數(shù)目增加，出現(xiàn)腹水的時間會縮短。此模型可連續(xù)傳代，在無菌情況下，取裸鼠移植瘤制成細胞懸液或腹水瘤細胞均可，離心后用原代細胞按以上方法接種，仍可形成腹水。
2.組織塊原位種植法 取人原發(fā)性結(jié)直腸惡性淋巴瘤原發(fā)灶和肝轉(zhuǎn)移灶術(shù)中新鮮瘤組織塊，對受體動物實施麻醉，取腹正中線切口，辨認結(jié)直腸，在漿膜面向腸壁內(nèi)做3mm切口深達黏膜層，以10.0無損傷縫合線經(jīng)切口將1mm3大小的瘤組織塊植人裸小鼠結(jié)直腸黏膜層內(nèi)，固定于腸壁黏膜層，關(guān)腹縫皮。然后進行體內(nèi)原位器官篩選，取同一瘤源肝轉(zhuǎn)移灶1mm3瘤小塊移植另一只裸鼠結(jié)腸黏膜層，成瘤后的肝轉(zhuǎn)移灶移植裸鼠結(jié)腸黏膜層。在裸鼠體內(nèi)重復4次連續(xù)篩選。取肝轉(zhuǎn)移灶進行裸鼠結(jié)腸移植，術(shù)后繼續(xù)飼養(yǎng)，觀察期為60~90天。當荷瘤裸鼠處于瀕死狀態(tài)時，取其中1只荷瘤裸鼠用頸椎脫位術(shù)處死，系統(tǒng)解剖，取出移植瘤。一部分瘤組織以原代移植方法進行鼠間連續(xù)傳代，每次傳代5~10只不等；另一部分瘤組織液氮凍存?zhèn)溆茫M行相關(guān)指標檢測。其他荷瘤裸鼠飼養(yǎng)至瀕死狀態(tài)或自然死亡，以觀察其腫瘤的生長、侵襲和轉(zhuǎn)移。
【模型特點】：
1.細胞種植法 模型有腹水形成，多則10ml左右，鏡下可見大量瘤細胞，且腹腔內(nèi)有瘤塊，主要分布腸系膜，貼近腸壁處及淋巴結(jié)節(jié)，腸系膜增厚粘連極為明顯。瘤細胞大小一致，核染色深，核分裂多，密集排列間質(zhì)少，瘤結(jié)節(jié)壞死明顯，脾臟無明顯浸潤，濾泡增生，生發(fā)中心明顯，巨核細胞多，肝、腎、肺未見瘤細胞浸潤。染色體檢查顯示所有中期相多倍體中，著絲粒帶型與人染色體一致，為人類染色體特征。細胞接種方法常用腹腔或皮下注射，一般來說，接種于皮下的模型，由于皮膚松弛，瘤結(jié)節(jié)可以較快生長，相應的宿主壽命較長，便于研究和觀察。應用成型的細胞系注射，可建立能夠連續(xù)傳代的B細胞淋巴瘤腹腔模型，成瘤率達100%。
2.組織塊原位種植法 這種類似人結(jié)腸惡性淋巴瘤病的高轉(zhuǎn)移模型移植瘤不僅在組織病理學、免疫組織化學表型、超微結(jié)構(gòu)、DNA倍體水平和染色體核型等方面與人源結(jié)直腸惡性淋巴瘤細胞相一致，而且腫瘤的移植生長率和液氮凍存復蘇成活率均為100%。
【模型的評估和應用】：
1.移植性腫瘤模型是篩選抗腫瘤新藥最常用的動物模型。其優(yōu)點在于容易操作和施加干擾因素，動物成瘤穩(wěn)定，成瘤率高，個體差異小，成瘤時間差異不大，且可以同種或同品系動物中連續(xù)移植長期保留供試驗之用。但是，此類腫瘤生長速度快，增殖比率高，體積倍增時間短，與人體腫瘤顯著不同。
2.自發(fā)性轉(zhuǎn)移模型是人癌轉(zhuǎn)移模型研究領(lǐng)域的難題，上述組織塊原位種植方法制備的轉(zhuǎn)移模型具有穩(wěn)定的生物學特性，為研究胃腸惡性淋巴瘤自發(fā)轉(zhuǎn)移提供了基本的實驗材料；該法在深入研究直結(jié)腸惡性淋巴瘤的生物學特性、組織發(fā)生、病因病理、侵襲和轉(zhuǎn)移機制、實驗治療等方面有不可取代的作用。
參考文獻：
1.于雷，劉永哲，孫世龍，等．c-myc基因與輻射誘發(fā)小鼠胸腺淋巴瘤的關(guān)聯(lián)性分析．吉林大學學報（醫(yī)學版），2009, 35 (6):971-974
2.尹志華，騰飛，唐運蓮，等．環(huán)孢素A對穩(wěn)定EBV誘發(fā)淋巴瘤模型的作用和意義．中國免疫學雜志，2002, 18(11):760-763
3.邱亞娟，張明智，李玲．EB病毒與淋巴瘤．國際腫瘤學雜志，2011, 38 (5):387-389
4.黃格芳，余英豪，李博．N－甲基亞硝基脲誘導小鼠胸腺淋巴瘤TCR基因重排分析．中國比較醫(yī)學雜志，2010,20(9):7-11
5.Xu D,Wang S,Yu WM,et al. A germline gain-of function mutation in Ptpnl 1 (Shp-2) phosphatase induces myeloproliferative disease by aberrant activation of hematopoietic stem cells. Blood,2010, 116(18):3611- 3621
6.Chen HJ.Yang BL,Chen YG,et al. A GFP-labeled human colon cancer metastasis model featuring surgical orthotopic implantation. Asian Pac J Cancer Prev, 2012, 13 (9):4263-4266
7.Chiarle R,Gong JZ,GuasparriⅠ,et al. NPM-ALK transgenic mice spontaneously develop T-cell lymphomas and plasma cell tumors. Blood, 2003, 101 (5):1919-1927
8.Wang S, Yu WM, Zhang W, et al. Noonan syndrome/ leukemia-associated gain-of-function mutations in SHP-2 phosphatase (PTPN 11) enhance cell migration and angiogenesis. J Biol Chem,2009,284(2):913-920
9.Benavides F, Gomez G, Venables-Griffith A, et al.Differential susceptibility to chemically induced thymic lymphomas in SENGARB and SSIN inbred mice. Mol Carcinog,2006,45 (7):543-548
10.da Silva Franchi CA,Bacchi MM,et al. Thymic lymphomas in Wistar rats exposed to N-methyl-N nitrosourea (MNU). Cancer Sci,2003,94(3):240-243
