前言
腎小球疾病(glomerular diseases)是病因、發(fā)病機(jī)制、臨床表現(xiàn)、病理改變、病程和預(yù)后不盡相同的主要累及雙腎腎小球的一組疾病，可分為原發(fā)性、繼發(fā)性和遺傳性。多數(shù)腎小球腎炎是免疫介導(dǎo)性炎癥疾病。一般認(rèn)為，免疫機(jī)制是腎小球病的始發(fā)機(jī)制，腎小球疾病動(dòng)物模型在探討發(fā)病機(jī)制、病理過程以及臨床治療等方面發(fā)揮重要作用。本節(jié)主要介紹了系膜增殖性腎小球腎炎、Thy1系膜增生性腎炎、微小病變型腎病、IgA腎病以及腎小球硬化性腎病動(dòng)物模型的建立方法和特點(diǎn)。
Thy1系膜增生性腎炎(mesangial proliferalive glomerulonephritis,MsPGN)模型為大鼠胸腺細(xì)胞抗體誘發(fā)的系膜增生性腎炎模型，是目前廣泛應(yīng)用并公認(rèn)比較典型的腎炎模型。
部分造模方法
使用動(dòng)物：大鼠
【造模機(jī)制】：
Thy1為大鼠胸腺細(xì)胞分化抗原，Thy1抗血清可直接與大鼠系膜細(xì)胞表面抗原結(jié)合激活補(bǔ)體形成膜攻擊復(fù)合體，導(dǎo)致細(xì)胞裂解，從而引起殘存的系膜細(xì)胞增生。經(jīng)其反復(fù)攻擊后，系膜細(xì)胞增生能較長(zhǎng)時(shí)間持續(xù)，最終成功誘發(fā)Thy1系膜增生性腎炎模型。
【造模方法】：
1.實(shí)驗(yàn)過程 家兔抗大鼠胸腺細(xì)胞抗血清的制備：卡介苗預(yù)致敏新西蘭大家兔，14天后見兩側(cè)腘窩淋巴結(jié)腫大，注射胸腺細(xì)胞(1011/L）與弗氏完全佐劑。3周后同樣途徑再次免疫。2周后經(jīng)耳緣靜脈第3次免疫。1周測(cè)效價(jià)，滿意后頸動(dòng)脈放血，收集血清，家兔抗血清經(jīng)大鼠肝粉吸附，-20℃保存，使用前56℃水浴30分鐘滅活補(bǔ)體。
模型制備：取大鼠(6~8周）尾靜脈注射家兔抗血清(0.6ml/100g)，分別于后1天、3天、5天、7天、2 周、3周、4周和5周處死動(dòng)物，取腎臟做相應(yīng)檢查。
2.指標(biāo)檢測(cè) 處死前隔日觀察其尿量、飲水量、24小時(shí)尿蛋白定量，將腎臟病理切片進(jìn)行H&E染色，光鏡觀察腎小球的病理變化，同時(shí)對(duì)細(xì)胞核增殖抗原(PCNA)、α－平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)進(jìn)行免疫染色觀察，并計(jì)數(shù)腎小球系膜有核細(xì)胞。
【模型特點(diǎn)】：
1.連續(xù)4次注射家兔抗血清，4周即可成功地建立Thy1系膜增生性腎炎模型。
2.病變明顯，系膜基質(zhì)增多顯著，病變腎小球體積增大，第1天系膜溶解，腎小球數(shù)明顯減少，第3天細(xì)胞開始增生，第7天顯著增加并可維持到第5周。
3.誘導(dǎo)28天、35天時(shí)，PCNA、α-SMA陽性細(xì)胞增多且病變持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)。
【模型評(píng)估和應(yīng)用】：
腎小球系膜細(xì)胞增生以及系膜基質(zhì)增多是多種類型腎炎常見的病理變化，也是腎小球硬化的早期階段特征。該模型腎炎病變明顯，系膜細(xì)胞增生顯著且持續(xù)存在，系膜細(xì)胞α-SMA持續(xù)陽性，表明系膜細(xì)胞一直處于活化增殖階段，病變持續(xù)活動(dòng)，更符合臨床上所見到的人類系膜增生性腎炎。該模型利用弗氏完全佐劑增強(qiáng)免疫，縮短了造模時(shí)間，癥狀典型，是目前國內(nèi)外公認(rèn)的研究系膜增殖性腎炎發(fā)病機(jī)制和防治措施的理想模型。
參考文獻(xiàn)：
1.湯穎，婁探奇，成彩聯(lián)，等實(shí)驗(yàn)性IgA腎病模型的改進(jìn)．中山大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)科學(xué)版），2006,27 (2): 184-187
2.吳漢利，孫偉．阿柔比星建立腎病模型的評(píng)價(jià)．中國中醫(yī)急癥，2010,19 (2):290-191
3.張麗芬，黃文政，朱小棣，等．阿霉素腎病腎小球硬化動(dòng)物模型的研究. 中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志，2005,6 (4):195-199
4.張克非，張亮，吳雄飛，等．大鼠抗Thy1系膜增生性腎小球腎炎模型發(fā)病機(jī)制探討．四川大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版）， 2004,35 (2): 188-190
5.陳廣平，郭恭依，張?jiān)露?，等．大鼠Thy1抗血清制備及系膜增生性腎炎模型的建立．臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，1996, 12 (3):241-243
6.黃勝，孫林，葉任高，等．兩種系膜增殖性腎炎大鼠模型的建立比較．中國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào)，2002, 10 (4): 236-238
7.Marquina R, Dfez MA,López-Hoyos M,el al. Inhibition of B cell death causes the development of an lgA nephropathy in(New Zealand white x C578L/6)F(l)-bel-2 transgenic mice. J lmmunol,2004,172(11):7177-7185
8.Zhang Z, Kundu GC, Yuan CJ, el al. Severe fibroneclindeposit renal glomerular disease in mice lacking uteroglobin. Science, 1997,276(5317): 1408-1412
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