細(xì)胞樣本寄送要求
1、冷凍儲(chǔ)存運(yùn)輸（凍存株）
干冰運(yùn)輸凍存細(xì)胞。外地寄送時(shí)，干冰消耗量約為4-5kg/24h（根據(jù)溫度會(huì)有所變動(dòng)），請(qǐng)根據(jù)寄送時(shí)長(zhǎng)訂購足量干冰，用厚實(shí)的泡沫箱進(jìn)行運(yùn)輸。
2、充液法常溫運(yùn)輸（T25瓶）
一般選擇生長(zhǎng)良好的細(xì)胞，以生長(zhǎng)60%~70%為宜，去掉舊培養(yǎng)液，補(bǔ)充新的培養(yǎng)液至瓶頸部，保留微量空氣，擰緊瓶蓋，并用封口膜密封，放在運(yùn)送盒內(nèi)，用棉花等做防震防壓處理。常溫，到達(dá)目的地后倒出多余的培養(yǎng)液，只需保留維持生長(zhǎng)所需的培養(yǎng)液置37℃培養(yǎng)，次日傳代。
提示：細(xì)胞寄送時(shí)，需告知細(xì)胞名稱、培養(yǎng)條件及凍存條件。
細(xì)胞流式檢測(cè)樣本采集要求
1、流式凋亡樣本送樣要求
【樣本收集】
貼壁細(xì)胞：
① 取出孔板（皿），小心收集上層清液于對(duì)應(yīng)編號(hào)的離心管中留用;
② 用不含EDTA胰酶消化，待細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，則終止消化；
③ 吸出懸液到離心管中（與同編號(hào)留用液體混合），離心收集細(xì)胞，加入適量無鈣PBS洗滌1次，離心收集細(xì)胞沉淀；
④ 在細(xì)胞沉淀中加入適量無鈣PBS重懸細(xì)胞，并將懸液轉(zhuǎn)移至1.5ml尖底EP管中，離心收集細(xì)胞沉淀，使用試劑盒自帶的binding buffer重懸，4℃運(yùn)輸置實(shí)驗(yàn)室（細(xì)胞量不低于1×10^5為宜）。
懸浮細(xì)胞：
① 取出孔板（皿），收集細(xì)胞懸液于對(duì)應(yīng)編號(hào)的離心管中留用；
② 離心收集細(xì)胞，加入適量無鈣PBS洗滌1次，離心收集細(xì)胞沉淀；
③ 在細(xì)胞沉淀中加入適量無鈣PBS重懸細(xì)胞，并將懸液轉(zhuǎn)移至1.5ml尖底EP管中；
④ 離心收集細(xì)胞沉淀，使用試劑盒自帶的binding buffer重懸，4℃運(yùn)輸置實(shí)驗(yàn)室（細(xì)胞量不低于1×10^5為宜）。
注意事項(xiàng)：
① 使用不含EDTA的胰酶消化收集細(xì)胞;
② 用無鈣PBS或者binding buffer（1x）重懸于1.5ml尖底EP管中（如果兩者均沒有，則用培養(yǎng)基重懸，送到本實(shí)驗(yàn)室再進(jìn)行洗滌與染色），4℃運(yùn)輸置實(shí)驗(yàn)室。細(xì)胞密度不低于1×10^5；
③ 樣本運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室后，再行染色，若樣品本身帶熒光，請(qǐng)?zhí)崆案嬷?/span>
④ 公司常備試劑盒為：AnnexinV-APC/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（凱基）;
⑤ 送樣前請(qǐng)至少提前一天預(yù)約，并告知相關(guān)信息（具體例數(shù)、檢測(cè)內(nèi)容、特殊要求等）。
2、流式ROS樣本送樣要求
貼壁細(xì)胞：
① 取出孔板（皿），用胰酶消化，待細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，則終止消化；
② 吸出懸液到離心管中，離心收集細(xì)胞，加入適量PBS洗滌1次，離心收集細(xì)胞沉淀；
③ 在細(xì)胞沉淀中加入適量PBS重懸細(xì)胞，并將懸液轉(zhuǎn)移至1.5ml尖底EP管中，離心收集細(xì)胞沉淀；
④ 使用4℃預(yù)冷PBS或者無血清培養(yǎng)基重懸，4℃運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室（細(xì)胞量不低于1×10^6為宜）。
懸浮細(xì)胞：
① 取出孔板（皿），離心收集細(xì)胞，加入適量PBS洗滌1次，離心收集細(xì)胞沉淀；
② 在細(xì)胞沉淀中加入適量PBS重懸細(xì)胞，并將懸液轉(zhuǎn)移至1.5ml尖底EP管中，離心收集細(xì)胞沉淀；
③ 使用4℃預(yù)冷PBS或者無血清培養(yǎng)基重懸，4℃運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室（細(xì)胞量不低于1×10^6為宜）。
注意事項(xiàng)：
① 用PBS重懸于1.5ml尖底EP管中（如果沒有，則用無血清培養(yǎng)基重懸，送到本實(shí)驗(yàn)室再進(jìn)行洗滌與染色），4℃運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室。細(xì)胞密度不低于1×10^6；
② 樣本運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室后，再行染色，若樣品本身帶熒光，請(qǐng)?zhí)崆案嬷?/span>
③ 公司常備試劑盒為：活性氧檢測(cè)試劑盒（碧云天）;
④ 送樣前請(qǐng)至少提前一天預(yù)約，并告知相關(guān)信息（具體例數(shù)、檢測(cè)內(nèi)容、特殊要求等）。
3、流式周期樣本送樣要求
貼壁細(xì)胞：
① 吸棄上層培養(yǎng)基，PBS洗滌細(xì)胞1次，吸棄液體；
② 胰酶消化，待細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，加入新鮮培養(yǎng)基終止消化并收集懸液于對(duì)應(yīng)編號(hào)離心管中，離心棄上清；
③ 加入適量PBS洗滌2次，離心收集細(xì)胞沉淀；
④ 用75％預(yù)冷乙醇重懸細(xì)胞，低溫運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室（細(xì)胞量為1×10^6為宜）。
懸浮細(xì)胞：
① 收集細(xì)胞懸液于對(duì)應(yīng)編號(hào)的離心管中，離心收集細(xì)胞沉淀；
② 加入適量PBS洗滌2次，離心收集細(xì)胞沉淀；
③ 用75％預(yù)冷乙醇重懸細(xì)胞，低溫運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室（細(xì)胞量為1×10^6為宜）。
注意事項(xiàng)：
① 周期細(xì)胞量為1×10^6為宜。采用尖底EP管/離心管，運(yùn)輸樣本，可減少后期處理時(shí)樣本的損耗；
② 固定后的細(xì)胞，4℃可存放一周左右，-20℃可存放一個(gè)月左右。短時(shí)間內(nèi)不檢測(cè)的話，建議保證冰乙醇的最終濃度為50%左右，避免樣品粘度太高，影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果；
③ 外地送樣，可在加入75％預(yù)冷乙醇固定后，低溫（泡沫盒+冰袋）郵寄至公司；
④ 送樣前請(qǐng)至少提前一天預(yù)約，并告知相關(guān)信息（具體例數(shù)、檢測(cè)內(nèi)容、特殊要求等）。
4、流式JC-1樣本送樣要求
貼壁細(xì)胞：
① 取出孔板（皿），用胰酶消化，待細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，則終止消化；
② 吸出懸液到離心管中，離心收集細(xì)胞，加入適量PBS洗滌1次，離心收集細(xì)胞沉淀；
③ 在細(xì)胞沉淀中加入適量無鈣PBS重懸細(xì)胞，并將懸液轉(zhuǎn)移至1.5ml尖底EP管中，離心收集細(xì)胞沉淀；
④ 使用4℃預(yù)冷PBS或者無血清培養(yǎng)基重懸，4℃運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室（細(xì)胞量不低于1×10^6為宜）。
懸浮細(xì)胞：
① 取出孔板（皿），離心收集細(xì)胞，加入適量PBS洗滌1次，離心收集細(xì)胞沉淀；
② 在細(xì)胞沉淀中加入適量PBS重懸細(xì)胞，并將懸液轉(zhuǎn)移至1.5ml尖底EP管中，離心收集細(xì)胞沉淀；
③ 使用4℃預(yù)冷PBS或者無血清培養(yǎng)基重懸，4℃運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室（細(xì)胞量不低于1×10^6為宜）。
注意事項(xiàng)：
① 用PBS重懸于1.5ml尖底EP管中（如果沒有，則用無血清培養(yǎng)基重懸，送到本實(shí)驗(yàn)室再進(jìn)行洗滌與染色），4℃運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室。細(xì)胞密度不低于1×10^6個(gè)/ml；
② 樣本運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室后，再行染色，若樣品本身帶熒光，請(qǐng)?zhí)崆案嬷?/span>
③ 公司常備試劑盒為：線粒體膜電位檢測(cè)檢測(cè)試劑盒（碧云天）；
④ 送樣前請(qǐng)至少提前一天預(yù)約，并告知相關(guān)信息（具體例數(shù)、檢測(cè)內(nèi)容、特殊要求等）。
5、流式組織樣本送樣
將新鮮組織置于預(yù)冷PBS中，4℃運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室。若樣品本身帶熒光，請(qǐng)?zhí)崆案嬷?/span>
6、流式血液樣本送樣要求
抗凝全血(大多數(shù)采用肝素鈉/EDTA抗凝)，采集后室溫保存，盡量2h內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室。
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